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威斯騰公眾號

CRISPR/Cas9靶向基因改造(敲除、敲入)技術是最新發展起來的一種強有力的基因組編輯工具。CRISPR技術的效率相較于TALEN技術要高得多,且可以一次性的對多個基因同時進行敲除和/或敲入?,F已廣泛用于各類動植物個體或細胞基因組的遺傳學改造。

威斯騰生物CRISPR/Cas9基因編輯團隊成立于2011年,目前擁有TALEN/CRISPR/Cas9技術完成細菌基因的敲除/敲入、細胞基因的敲除/敲入、動物個體(大小鼠、豬等模式動物)的基因敲除/敲入等先進技術手段,曾為全國各科研院所及中科院系統提供CRISPR/Cas9技術相關服務,完成40余例動物個體基因敲除。威斯騰生物戰略合作平臺——美國國立衛生研究院(National Institutes of Health,NIH),團隊成員曾于Nature等國際一流科研雜志發表大量CRISPR/Cas9相關研究成果。


技術優勢

基因定點編輯技術優勢

應用方向

1、靶向基因沉默    2、 體外DNA/RNA分子的位點特異性切割    3、基因定點突變    4、模式動物/細胞株改造


案  例

CRISPR/Cas9基因敲入小鼠模型

根據基因序列設計合成sgRNA,針對Knockin插入點或點突變位置構建含Knockin片段或點突變的同源序列,與Cas9 mRNA共同注射到小鼠受精卵胞質,Cas9核酸酶、sgRNA、基因組靶序列結合并切割雙鏈DNA,以含Knockin的同源序列為模版修復基因組DNA,最終獲得在目的DNA序列插入Knockin片段或點突變的Knockin小鼠。

CRISPR/Cas9基因敲除動物

根據基因序列設計合成兩個sgRNA,分別針對兩個Loxp的插入點,構建含Loxp的同源序列,與Cas9 mRNA共同注射到小鼠受精卵胞質,Cas9核酸酶、sgRNA、基因組靶序列結合并切割雙鏈DNA,以含Loxp同源序列為模版修復基因組DNA,最終獲得在待敲除目的DNA序列兩端各有一個LoxP序列的Flox小鼠。

CRISPR/Cas9基因敲除動物

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