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病理學檢測
激光共聚焦顯微鏡

時間:2020-07-22 17:07:00 瀏覽:5008次


一、激光共聚焦顯微鏡

激光掃描共聚焦顯微鏡是采用激光作為光源,在傳統光學顯微鏡基礎上采用共軛聚焦原理和裝置,并利用計算機對所觀察的對象進行數字圖象處理的一套觀察、分析和輸出系統。主要系統包括激光光源、自動顯微鏡、掃描模塊(包括共聚焦光路通道和針孔、掃描鏡、檢測器)、數字信號處理器、計算機以及圖象輸出設備(顯示器、彩色打印機)等。通過激光掃描共聚焦顯微鏡,可以對觀察樣品進行斷層掃描和成像。因此,可以無損傷的觀察和分析細胞的三維空間結構。同時,通過激光掃描共聚焦顯微鏡也是活細胞的動態觀察、多重免疫熒光標記和離子熒光標記觀察的有力工具。


儀器名稱:激光共聚焦顯微鏡

英文名:Leica TCS SP2 AOBS

型號與規格:TCS SP2 AOBS


二、激光共聚焦顯微鏡組成

1、共聚焦掃描系統
1)獨立雙向掃描鏡??梢栽谡蔑@微鏡和倒置顯微鏡之間迅速互換。儀器永久不用校正;可調的計算機控制單共焦針孔、孔徑20600μm
2)光譜掃描區400850nm
3)單線掃描頻率≥2000/
4)圖掃描率≥3/512×512pixels;≥20/512×32pixels
5)掃描分辨率4096*4096掃描放大132X;多方位序列掃描方式;任意形狀區域掃描-范圍:≥22mm。
6)光譜斜陡率 1
7)透射光檢測器用于微分干涉相襯法檢驗
8)低噪音 冷卻型光電倍增管(PNT)控測器12bi
2
、激光裝置
具有多通道AOTF(四通道,八譜線),連接四種不同波長的可見光激光可以自動選擇激光譜線和功率,具等待功能。光纖耦合連接低能量激光。目前使用五激光,八譜線。Ar激光發生器 458nm/5mw,476nm/5mw,488nm/20mw,514nm/20mw-藍;He/Ne激光發生器(543nm/1.2mw-綠;He/Ne激光發生器(633nm/10mw,594nm/2mv-紅,紫外激光發生器(405nm/25mv
3
、顯微鏡:DMIRE2倒置電動熒光顯微鏡,擁有10x,20x,40x干鏡以及63x,100x油鏡。配置電動編碼物鏡轉座,Z軸電動驅動和干涉相襯的編碼棱鏡轉輪。
4
、計算機工作站
WindowsXP
操作系統,8個同步接收器通道,12bit同步數字轉換,超寬的SCSI電腦介面,高性能的電腦工作站,兩個監視器,計算機彩色顯示


主要附件和功能:

觀察細胞精細結構。用于檢測各種染色,非染色和熒光標記的組織和細胞等,在可見光范圍內熒光的定位定量分析,組織光學切片,基因染色體定位,基因亞細胞定位,離子通道研究.

三、檢測的優勢

與傳統光學顯微鏡相比,主要解決了生物樣品結構相互重疊影響觀察的問題,并可形成清晰的三維圖象。在檢測方面的主要優勢有:

1、對活細胞和組織或細胞切片進行連續掃描,可獲得精細的單個或一群細胞或者觀察到局部組織的各個層面結構(包括細胞特異結構細胞骨架、染色體、細胞器和細胞膜系統,樣品的深層結構)的三維圖像。

2、細胞內離子熒光標記,單標記或三奈記,檢測細胞內如PH和鈉、鈣、鎂等離子濃度的比率測定及動態變化。

3、熒光標記探頭標記的活細胞或切片標本的活細胞生物物質,膜標記、免疫物質、免疫反應、受體或配體,核酸等觀察;可以在同一張樣品上進行同時多重物質標記,同時觀察;

4、熒光檢測快、激發光強度精確控制、光漂白和熒光淬滅作用??;

5、對細胞檢測無損傷、精確、準確、可靠和優良重復性;數據圖象可及時輸出或長期儲存。


四、樣品要求

樣品制備無特殊要求;各種染色、非染色、熒光標記的組織(包括活組織)、培養細胞、粘附細胞、細胞涂片、石蠟切片、冰凍切片。


五、應用領域

1、細胞生物學:細胞結構、細胞骨架、細胞膜結構、流動性、受體、細胞器結構和分布變化、細胞凋亡;

2、生物化學:酶、核酸、FISH(熒光原位雜交)、受體分析

3、藥理學:藥物對細胞的作用及其動力學;

4、生理學:膜受體、離子通道、細胞內離子含量、分布、動態;

5、遺傳學和組胚學:細胞生長、分化、成熟變化、細胞的三維結構、染色體分析、基因表達、基因診斷;

6、神經生物學:神經細胞結構、神經遞質的成分、運輸和傳遞、遞質受體、離子內外流、 神經組織(如大腦皮質)結構、細胞分布;

7、微生物學和寄生蟲學:細菌、寄生蟲形態結構(表面和內部結構);

8、病理學及病理學臨床應用:活檢標本的快速診斷、腫瘤診斷、自身免疫性疾病的診斷,HIV,宮頸上皮細胞涂片診斷;

9、生物學、免疫學、環境醫學和營養學;


六、服務流程


威斯騰生物服務項目


分子生物學檢測 蛋白質與免疫學 動物實驗
實時熒光定量PCR 單克隆抗體制備 帕金森疾病模型
免疫共沉淀(Co-IP) 多克隆抗體制備 抑郁癥動物模型
ELISA(酶聯免疫吸附法)技術 Western-blot 實驗服務 脊髓損傷模型
生化指標檢測 蛋白雙向電泳實驗服務 腦外損傷模型
雙熒光素酶報告基因檢測 原核蛋白表達純化 骨神經損傷模型
染色質免疫共沉淀(ChIP) 真核蛋白表達純化 心肌缺血模型
GST pull Down ITRAQ定量蛋白質組學 心力衰竭模型
SLAC蛋白組學 肺動脈高血壓動物模型
高血壓模型
病毒包裝純化 實驗課題整體外包 粥樣動脈硬化模型
過表達/干擾慢病毒包裝純化 整體課題外包 大腦中動脈阻塞模型
過表達/干擾腺病毒包裝純化 細胞整體實驗外包 慢性之氣管炎模型
逆轉錄病毒包裝純化 動物整體實驗外包 過敏性哮喘模型
腺相關病毒包裝純化 肺炎大鼠模型
肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片 原代細胞培養 肝纖維化模型
細胞因子芯片 骨髓間充質干細胞培養 膽結石模型
生長因子芯片 脂肪干細胞培養 急性胰腺炎模型
信號通路磷酸化水平檢測芯片 心肌成纖維細胞培養 急性腎衰竭模型
BioPlex懸浮芯片 軟骨細胞培養 體內血栓模型
生長因子芯片 血管內皮細胞培養 關節炎模型
炎癥因子芯片 神經元細胞培養 I型和II型糖尿病模型
血管生成因子芯片 內皮組細胞原代培養 裸鼠成瘤
凋亡因子芯片 基因編輯動物
趨化因子芯片 電生理相關服務 動物整體實驗服務
HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 膜片鉗實驗
細胞生物學 高通量測序 代謝組學
細胞原代培養 mRNA測序 氣相色譜GC/MS
MTT檢測 LncRNA測序 液相色譜LC/MS
細胞凋亡檢測 全基因組測序 核磁共震NMR
細胞周期檢測 RNA-Seq測序
細胞克隆形成實驗 外顯子測序 影像學相關實驗
Transwell細胞遷移/侵襲 16s擴增子測序 Micro-CT
流式分選 Small RNA測序 小動物活體成像
CCK8/XTT檢測 宏基因組測序 核磁共振
臺盼藍檢測細胞活性 單細胞測序 PET-CT
藥物篩選細胞學實驗 circleRNA測序
細胞粘附性檢測 甲基化測序 基因編輯動物
細胞劃痕實驗 條件性敲除小鼠/大鼠
細胞生物學整體實驗 全基因敲除小鼠/大鼠
細胞成管實驗
病理學檢測 CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入 基因芯片
掃描電鏡 基因定點突變細胞系 LncRNA芯片
透射電鏡 單基因敲除細胞系 miRNA芯片
HE染色 多基因敲除細胞系 mRNA芯片
免疫組化 目的基因敲入細胞系 甲基化芯片(限人和小鼠來源樣本)
Tunel(原位末端凋亡法)檢測 報告基因敲入細胞系 SNP芯片(限人和小鼠來源樣本)
激光共聚焦 miRNA/LncRNA敲除細胞系
免疫熒光
Masson染色 CRISPR/Cas9動物敲除/敲入
原位雜交 基因敲除大鼠/小鼠
熒光原位雜交 基因敲入大鼠/小鼠
特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍等)
行為學檢測 藥物篩選服務項目 藥效學評價
水迷宮實驗 高通量自動藥物篩選平臺 神經系統藥物藥效學評價
曠場實驗 細胞高內涵藥物篩選平臺 抗腫瘤藥物藥效學評價
重復性刻板行為檢測 蛋白質組學靶標研發平臺 心血管系統藥物藥效學評價
動物跑臺檢測 分子藥理研究平臺 泌尿系統藥物藥效學評價
強迫游泳 生物膜片鉗藥物篩選平臺 內分泌系統藥物藥效學評價
常規藥物體外篩選 抗炎免疫藥物藥效學評價


【本平臺合作項目】

分子生物學、細胞生物學、病理染色檢測、細胞敲除&敲入、模式與轉基因動物、SPF動物保種、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務!

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